Развитие и оценка эмбрионов. Компактизация и морула (3-й—5-й дни)

Морула. Класторизация

На 3—4 день развития начинается процесс компактизации: между бластомерами устанавливаются так называемые плотные контакты, и они «распластываются» друг по другу, создавая слитную механически напряженную структуру – компактную морулу. Стадия морулы присутствует у многих видов, но у амфибий, рыб и пр. она выглядит, как «гроздь винограда», и только у млекопитающих – как «комок пластилина» за счет плотных контактов между клетками и механического натяжения. В компактной моруле границы клеток практически неразличимы.

Морула, но еще не компактная

Морула, но еще не компактная

После компактизации

После компактизации

Схема компатизации (по [Fierro-Gonzalez, 2013])

Схема компатизации (по [Fierro-Gonzalez, 2013])

Строго говоря, компактизация происходит не за счет установления плотных контактов.

Сначала клетки начинают формировать длинные отростки, которыми пытаются «зацепиться» за «соседей». На конце отростков локализуются так называемые кадгерины – белки межклеточных контактов. Они «прилипают» к кадгеринам соседних клеток, но это «прилипание» требует ионов кальция. Если же кальция в среде нет, контакт не установится.

Образование «отростков» с кадгеринами (по [Fierro-Gonzalez, 2013])

Образование «отростков» с кадгеринами
Образование «отростков» с кадгеринами

Одновременно клетки поляризуются, и вдоль внешней поверхности собирается так называемый актиновый цитоскелет (он есть везде, но здесь он особо развит). Этот цитоскелет механически натягивает внешние поверхности клеток. В итоге, клетки начинают «распластываться» друг по другу – эмбрион компактизуется. Однако, на этом этапе компактизация требует кальция. И если эмбрион поместить в среду без кальция, морула снова «раскомпактизуется», превратившись в подобие виноградной грозди.

На следующем этапе между клетками устанавливаются настоящие плотные контакты, и морула теряет свою «кальций-зависимость». Эти этапы так и называются: кальций-зависимая и кальций-независимая морула.

Качество морулы оценивать сложнее всего, но тоже возможно. Морула должна состоять не менее, чем из 8 клеток и быть «хорошо компактизованной», т.е. почти сферической формы, без «выступов» и «впадин». Если морула состоит из меньшего числа клеток, или они образуют отдельные несвязанные компактные области, это снижает оценку. Также снижают оценку вакуоли и фрагментация.

Наиболее известная классификация морул – по [Tao et al., 2002 ].

Система оценки эмбрионов стадии компактизации/морулы по [Tao et al., 2002]

Система оценки эмбрионов стадии компактизации/морулы по [Tao et al., 2002]Ы

Примеры оценки эмбрионов стадии компактизации/морулы [Tao et al., 2002]

Примеры оценки эмбрионов стадии компактизации/морулы

Мы, однако, во избежание путаницы, предпочитаем использовать все те же универсальные обозначения: a – отлично; b – хорошо; c – плохо.

Например:

M a (или mor a) – отличная морула (grade 4 по Tao);

M b (или mor b) – хорошая морула (grade 3 по Tao).

Эмбрион, частично компактный, или только начавший компактизацию, можно обозначить:

cod (от слова compacted) и, при необходимости, добавить «степень компатизации» (процент клеток, вошедших в компактную область). Например:

cod a – эмбрион в стадии компактизации отличного качества (такая оценка применима к эмбрионам третьего дня, которые уже активно компактизуются, но морулой еще «не назовешь»).

cod40% – эмбрион в стадии компатизации, у которого компактная область занимает около 40% его объема (в классификации Tao это соответствует grade 1).

В некоторых клиниках используют такие обозначения:

e.comp – начало компактизации (от слов early compaction);

p.comp – частично компактный (от слов partially compact).

При необходимости, можно, также как и раньше, использовать дополнительные обозначения: f (фрагментация), gr (грануляция), vac (вакуоли) и т.д. (см. раздел «Дробление»).

Рекомендации [ALPHA-ESHRE consensus, 2011] по оценке эмбрионов в период компактизации

Рекомендации ALPHA-ESHRE consensus, 2011 по оценке эмбрионов в период компактизации

Однако, как и с предыдущими стадиями, «хорошая» морула не гарантирует образование бластоцисты, и наоборот, «плохая» морула и даже отсутствие компактизации на 4-й день еще не гарантирует остановку развития.

Документы, на которые мы ссылаемся в тексте статьи, можно просмотреть ниже:

  1. Fierro-González JC, White MD, Silva JC, Plachta N. Cadherin-dependent filopodia control preimplantation embryo compaction. Nat Cell Biol. 2013 Dec;15(12):1424-33.
  2. Bruce AW, Zernicka-Goetz M. Developmental control of the early mammalian embryo: competition among heterogeneous cells that biases cell fate. Curr Opin Genet Dev. 2010 Oct;20(5):485-91
  3. Maître JL, Turlier H, Illukkumbura R, Eismann B, Niwayama R, Nédélec F, Hiiragi T. Asymmetric division of contractile domains couples cell positioning and fate specification. Nature. 2016 Aug 18;536(7616):344-8.
  4. Turlier H, Maître JL. Mechanics of tissue compaction. Semin Cell Dev Biol.2015 Dec;47-48:110-7.
  5. Tao J, Tamis R, Fink K, Williams B, Nelson-White T, Craig R. The neglected morula/compact stage embryo transfer. Hum Reprod. 2002 Jun;17(6):1513-8.
  6. Alpha Scientists in Reproductive Medicine and ESHRE Special Interest Group of Embryology. The Istanbul consensus workshop on embryo assessment: proceedings of an expert meeting. Hum Reprod. 2011 Jun;26(6):1270-83.
  7. Bolton VN, Hawes SM, Taylor CT, Parsons JH. Development of spare human preimplantation embryos in vitro: an analysis of the correlations among gross morphology, cleavage rates, and development to the blastocyst. J In Vitro Fert Embryo Transf. 1989 Feb;6(1):30-5.
  8. Nasiri N, Eftekhari-Yazdi P. An Overview of The Available Methods for Morphological Scoring of Pre-Implantation Embryos in In Vitro Fertilization. Cell Journal (Yakhteh). 2015;16(4):392-405.

Поделитесь этим:

Posted in Развитие эмбрионов, Статьи and tagged , , , , .

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *